Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling (TUNEL) is a method for detecting DNA fragmentation by labeling the 3′- hydroxyl termini in the double-strand DNA breaks generated during apoptosis.

基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。

凋亡细胞的DNA双链断裂或一条链出现缺口，产生一系列3’-OH末端，在脱氧核糖核苷酸末端转移酶 (TdT)作用下，将 脱氧核糖核苷酸 和生物素所形成的衍生物标记到DNA的3′末端，从而进行凋亡细胞的检测。 TUNLE染色 是分子生物学与形态学相结合的研究方法，对完整的单个凋亡细胞核或 凋亡小体 进行原位染色，能准确的反应细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征。 实验步骤. 使细胞或组织贴在载玻片上 固定 洗涤 通透 洗涤 预平衡 用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链 终止反 …

Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) dUTP Nick-End Labeling (TUNEL) assay has been designed to detect apoptotic cells that undergo extensive DNA degradation during the late stages of apoptosis. The method is based on the ability of TdT to label blunt ends of double-stranded DNA breaks indepen …

细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法。 由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。 由此，TUNEL成为了检测DNA片段化（细胞凋亡）的最常用方法 …

细胞凋亡中, 染色体DNA 双链断裂 或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将 脱氧核糖核苷酸 和荧光素、过氧化物酶、 碱性磷酸酶 或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可进行凋亡细胞的检测。 这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法。 由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。 由此，TUNEL成为了检测DNA片段化（细胞凋亡）的最常用方法 …

2023年10月24日 · 在细胞凋亡过程中， 细胞缩小，DNA被核酸内切酶降解成180bp-200bp片段属于有层次之断裂（可以通过 凝胶电泳 证明），而细胞坏死时， 细胞肿胀，细胞膜被破坏，通透性改变。 细胞器散落到细胞间质，需要巨噬细胞去清除，结果是该局部组织发炎。 相比起细胞坏死，细胞凋亡是更常见的细胞死亡形式。 细胞凋亡受到抑凋亡因子和促凋亡因子的调控，导致 DNA 断裂、细胞膜变形并形成 凋亡小体 (apoptotic body)。 细胞凋亡是生物体内的一个重要生理过 …

使用直接与荧光染料FITC标记的核苷酸的 TUNEL 染色测定方案比使用抗体或链霉亲和素-生物素复合物的间接方法更快，因为它们需要更少的染色步骤。 通常情况下2个小时解决问题。 我们买的Kit 是Roche 荧光染色的【In Situ Cell Death Detection Kit】

TUNEL Assay is a technique that allows for the detection of both single and double strand DNA breaks, using fluorescent or light microscopy, and can be coupled with flow cytometry for high-throughput analysis of thousands of samples, ensuring accuracy and reproducibility.

The TUNEL assay is based on the identification of DNA breaks by addition of template-independent DNA polymerase called terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) to the 3′hydroxyl (OH) breaks-ends of single and double stranded DNA.